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LM: Biologia Cellulare e Molecolare Avanzata (2009-2010)
Task 8: Where is the mistake....

Opened: Saturday, 17 October 2009, 10:50 PM
Due: Sunday, 15 November 2009, 10:50 PM
A proposito della tecnica dell'immunoprecipitazione illustrata nel Task N.1 hanno detto:
  1. lavare e raccogliere le cellule in una soluzione detergente, generalmente si utilizza il PBS
  2. Il lisato cellulare viene centrifugato ed è prelevato il surnatante (prevalentemente citosol)
  3. La fase successiva detta Preclear consiste nell’aggiunta di proteina A (o proteina G) immobilizzata su delle beads di agorosio al lisato cellulare per eliminare dal campione le proteine che possono avere delle interazioni non specifico, in questo modo si ridimensiona il campo di interesse.
  4. Si potranno ottenere complessi Ag-Ig che non porteranno obbligatoriamente ad una IP. Essa avviene solo quando si forma un reticolo di Ag-Ig insolubile al punto di equivalenza.
  5. Tecniche più accurate implicano l'immobilizzazione della proteina G o A su un supporto gel (Es. Poliacrilamde) e l'incubazione del gel con il campione
Per ciascuna affermazione trovare e commentare le inesattezze o errori
◄ Read the article (optional): Pei et al. 2009, dedifferentiation review.pdf
Seminario "biosafety/biosecurity tools and policies", Malcom Dando and Giulio Mancini. Venerdì 23 ottobre 2009, 11-13 ►
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