Task 09: Where is the mistake....

Opened: Monday, 25 October 2010, 7:50 PM
Due: Tuesday, 9 November 2010, 11:00 PM
A proposito della tecnica dell'immunoprecipitazione illustrata nel Task N.1 hanno detto:
  1. lavare e raccogliere le cellule in una soluzione detergente, generalmente si utilizza il PBS
  2. Il lisato cellulare viene centrifugato ed è prelevato il surnatante (prevalentemente citosol)
  3. La fase successiva detta Preclear consiste nell’aggiunta di proteina A (o proteina G) immobilizzata su delle beads di agorosio al lisato cellulare per eliminare dal campione le proteine che possono avere delle interazioni non specifiche, in questo modo si ridimensiona il campo di interesse.
  4. Si potranno ottenere complessi Ag-Ig che non porteranno obbligatoriamente ad una IP. Essa avviene solo quando si forma un reticolo di Ag-Ig insolubile al punto di equivalenza.
  5. Tecniche più accurate implicano l'immobilizzazione della proteina G o A su un supporto gel (Es. Poliacrilamde) e l'incubazione del gel con il campione
Per ciascuna affermazione trovare e commentare le inesattezze o errori