site-directed mutagenesis
Sito diretto Approcci mutagenesi sono utili per la produzione di mutazioni in un punto preciso della sequenza
Che includono tecniche sono sviluppate Stato:
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- Dnp1
- overlap extention
- Kunkel methods
- site - directed mutagenesis using PCR: utilizzo di primers che portano la mutazione volutain modo da incorporarla nella sequenza, che verrà poi prodotta in grandi quantità grazie alla PCR
- Mutagenesi diretta da oligonucleotide
- Mutagenesi diretta da oligonucleotide con selezione di un filamento fosforotioato
- cassette mutagenesis: Cassette mutagenesis utilizza il taglio di un enzima di restrizione in un sito del plasmide e la seguente ligazione di un oligonucleotide ccontenente la mutazione nel gene di interesse
- Transposons: utilizza delle sequenze di DNA mutate in grado di inserirsi automaticamente nel gene voluto.
- megaprimer method
- Mutagenesi USE
- site - directed mutagenesis using positive antibiotic selection
- SLIM: site-directed ligase-indipendent mutagenesis
- Sistema Quick Change