Per procedere con il congelamento abbiamo utilizzato la piastra 1 :

NIH0010 10 x - Immagine di cellule confluenti al 100 % prima del congelamento

Abbiamo seguito il protocollo per il mantenimento della linea cellulare per preparare una cryovials da congelare per 5 giorni a -80°C.
Per un errore dell'operatore è stata aspirata dalla piastra la tripsina con le cellule in sospensione, quindi si è proceduto con il reinserimento di 2 ml di tripsina per staccare le cellule rimaste adese.
Al termine dei cinque giorni abbiamo preso il cryovial dall'incubatore e ne abbiamo prelevato il contenuto per testare la sopravvivenza cellulare.
Per errore è stato aspirato insieme al surnatante anche parte del pellet cellulare ma è stato comunque possibile procedere con il saggio di sopravvivenza cellulare.

Nei giorni successivi si è quindi passato alla conta delle cellule vive (bianche) e morte (blu) tramite la camera di Burker ottenendo i seguenti risultati:

> Cellule Morte : 9,5*10^4 cellule/ml  quindi 19*10^4 cellule totali

> Cellule Vive : 94,75*10^4 cellule/ml  quindi 189,5*10^4 cellule totali

Tramite l'applicazione di una semplice proporzione che teneva conto del numero di cellule totali (vive e morte) abbiamo calcolato la percentuale di cellule vive, 91% e morte, 9%.