Task N.7: site-directed mutagenesis


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site-directed mutagenesis

Sito diretto Approcci mutagenesi sono utili per la produzione di mutazioni in un punto preciso della sequenza


Che includono tecniche sono sviluppate Stato:
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  1. Dnp1
  2. overlap extention
  3. Kunkel methods
  4. site - directed mutagenesis using PCR: utilizzo di primers che portano la mutazione volutain modo da incorporarla nella sequenza, che verrà poi prodotta in grandi quantità grazie alla PCR
  5. Mutagenesi diretta da oligonucleotide
  6. Mutagenesi diretta da oligonucleotide con selezione di un filamento fosforotioato
  7. cassette mutagenesis: Cassette mutagenesis utilizza il taglio di un enzima di restrizione in un sito del plasmide e la seguente ligazione di un oligonucleotide ccontenente la mutazione nel gene di interesse
  8. Transposons: utilizza delle sequenze di DNA mutate in grado di inserirsi automaticamente nel gene voluto.
  9. megaprimer method
  10. Mutagenesi USE
  11. site - directed mutagenesis using positive antibiotic selection
  12. SLIM: site-directed ligase-indipendent mutagenesis
  13. Sistema Quick Change